Website: https://vjfc.nifc.gov.vn/
Website: https://vjfc.nifc.gov.vn/
Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HearNPV) là tác nhân sinh học được ứng dụng trong phòng trừ sâu xanh đục trái Helicoverpa armigera, đối tượng gây hại nghiêm trọng trên nhiều cây trồng kinh tế. Việc phát triển và sử dụng thuốc bảo vệ thực vật sinh học chứa HearNPV góp phần giảm thiểu tác động bất lợi của thuốc hóa học, phù hợp với định hướng phát triển nông nghiệp bền vững. Tuy nhiên, phương pháp định lượng thể vùi virus (occlusion bodies - OB) truyền thống bằng buồng đếm hồng cầu còn nhiều hạn chế về độ chính xác, tính lặp lại và khả năng phân biệt OB với các hạt phụ gia trong nền chế phẩm. Kỹ thuật real-time PCR cho phép phát hiện và định lượng DNA virus với độ nhạy, độ đặc hiệu và độ lặp lại cao, đã được ứng dụng thành công trong kiểm soát chất lượng nhiều chế phẩm virus trên thế giới. Trong nghiên cứu này, phương pháp realtime PCR định lượng thể vùi HearNPV được xây dựng dựa trên việc khuếch đại đoạn gen mã hóa DNA polymerase đặc hiệu của virus. DNA tách chiết từ mẫu thử có nồng độ xác định bằng buồng đếm hồng cầu được sử dụng để thiết lập đường chuẩn và làm cơ sở định lượng mật độ OB tương ứng trong mẫu thuốc bảo vệ thực vật. Kết quả cho thấy phương pháp xây dựng có độ chính xác, độ nhạy và độ đặc hiệu đạt 100%, với giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng là 10² OB/mL và không ghi nhận tín hiệu khuếch đại ở các mẫu đối chứng âm. Đường chuẩn thu được có mối tương quan tuyến tính tốt giữa giá trị Ct và log₁₀ nồng độ virus (R² = 0,995), với hiệu suất khuếch đại đạt 90,5%; độ lặp lại và độ tái lập đều đáp ứng tiêu chí chấp nhận theo ISO 22118:2011. Từ đây, phương pháp cho thấy tiềm năng ứng dụng trong định lượng và kiểm soát chất lượng thuốc bảo vệ thực vật sinh học chứa HearNPV.
Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus; real-time PCR; định lượng virus; thuốc bảo vệ thực vật; buồng đếm hồng cầu.
[1]. M. Tudi, H. D. Ruan, L. Wang, et al., “Agriculture Development, pesticide application and its impact on the environment,” International Journal of Environmental Research and Public Health, vol. 18, no. 3, p. 1112, 2021.
[2]. V. M. Pathak, V. Verma, B. S. Rawat, et al., “Current status of pesticide effects on environment, human health and its eco-friendly management as bioremediation: A comprehensive review,” Frontiers in Microbiology, vol. 13, p. 962619, 2022.
[3]. M. S. Ayilara, O. S. Adeleke, S. A. Akinola, et al., “Biopesticides as a promising alternative to synthetic pesticides: A case for microbial pesticides, phytopesticides, and nanobiopesticides,” Frontiers in Microbiology, vol. 14, p. 1040901, 2023.
[4]. G. M. Daraban, R. M. Hlihor, L. C. Rosca, et al., “Pesticides vs. Biopesticides: from pest management to toxicity and impacts on the environment and human health,” Toxics, vol. 11, no. 12, p. 983, 2023.
[5]. M. Martínez-Balerdi, J. Caballero, E. Aguirre, et al., “Baculoviruses as microbial pesticides: potential, challenges, and market overview,” Viruses, vol. 17, no. 7, p. 917, 2025.
[6]. Y. Gelaye and B. Negash, “The role of baculoviruses in controlling insect pests: A review,” Cogent Food & Agriculture, vol. 9, no. 1, p. 2254139, 2023.
[7]. R. Jayaraj, P. Megha, and P. Sreedev, “Organochlorine pesticides, their toxic effects on living organisms and their fate in the environment,” Interdisciplinary Toxicology, vol. 9, no. 3-4, pp. 90-100, 2016.
[8]. C. A. Damalas and S. D. Koutroubas, “Farmers’ exposure to pesticides: Toxicity types and ways of prevention,” Toxics, vol. 4, no. 1, p. 1, 2016.
[9]. J. H. Chang, M. L. Choi, J. S. Park, et al., “An improved baculovirus insecticide producing occlusion bodies that contain Bacillus thuringiensis insect toxin,” Journal of Invertebrate Pathology, vol. 84, no. 1, pp. 30-37, 2003.
[10]. R. Chaudhary, S. Kumar, V. Sharma, et al., “Microbial bio-control agents in sustainable pest management: Current status and future prospects,” Journal of Agriculture and Food Research, vol. 18, p. 101421, 2024.
[11]. R. I. Graham, K. S. Grzywacz, J. Wilson, et al., “Development of a real-time qpcr assay for quantification of covert Baculovirus infections in a major African crop pest,” Insects, vol. 6, no. 3, pp. 746-759, 2015.
[12]. L. A. da Silva, B. R. de Camargo, A. A. F. M. S. Fisch, et al., “Identification and detection of known and new viruses in larvae of laboratory-reared fall armyworm, Spodoptera frugiperda,” Journal of Invertebrate Pathology, vol. 210, p. 108290, 2025.
[13]. I. Nazli-Huda, A. Sajap, and W. Lau, “Stability of Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus in sodium dodecyl sulphate,” African Journal of Biotechnology, vol. 11, no. 16, pp. 3877-3881, 2012.
[14]. M. R. Pedrini, S. Reid, L. K. Nielsen, and L. C. Chan, “Kinetic characterization of the group II Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus propagated in suspension cell cultures: Implications for development of a biopesticides production process,” Biotechnology Progress, vol. 27, no. 3, pp. 614-624, 2011.
[15]. H. R. Lee, J. Jung, M. Riu, and C. M. Ryu, “A new frontier for biological control against plant pathogenic nematodes and insect pests I: by microbes,” Research in Plant Disease, vol. 23, no. 2, pp. 114-149, 2017.
[16]. Y. Gelaye and B. Negash, “The role of baculoviruses in controlling insect pests: A review,” Cogent Food & Agriculture, vol. 9, no. 1, p. 2254139, 2023.
[17]. Tuoi Tre Online, “Vietnam to increase the use of biological plant protection products by 30%,” Dec. 28, 2023. [Online]. Available: https://tuoitre.vn/viet-nam-se-su-dung-thuoc-bao-ve-thuc-vat-sinh-hoc-tang-them-30-20231228155953896.htm [Accessed Oct. 24, 2025].
[18]. E. A. Herniou, J. A. Olszewski, J. S. Cory, and D. R. O’Reilly, “The genome sequence and evolution of baculoviruses,” Annual Review of Entomology, vol. 48, pp. 211-234, 2003.