Bìa tạp chí

Website: https://vjfc.nifc.gov.vn/

009bet

Xây dựng phương pháp định lượng Plutella xylostella granulovirus trong thuốc bảo vệ thực vật bằng kỹ thuật realtime PCR

Phạm Ngọc Hà Nguyễn Tuấn Thành Hà Anh Thư Trần Hồng Ba Vũ Thị Quý
Ngày nhận: 06/08/2025
Đã sửa đổi: 01/12/2025
Ngày chấp nhận: 21/12/2025
Ngày đăng: 29/12/2025

Chi tiết

Các trích dẫn
Phạm Ngọc Hà, Nguyễn Tuấn Thành, Hà Anh Thư, Trần Hồng Ba, Vũ Thị Quý. "Xây dựng phương pháp định lượng Plutella xylostella granulovirus trong thuốc bảo vệ thực vật bằng kỹ thuật realtime PCR". Tạp chí Kiểm nghiệm và An toàn thực phẩm. , pp. 369-378, 2025
Phát hành
PP
369-378
Counter
0

Main Article Content

Tóm tắt

Plutella xylostella granulovirus (PlxyGV) là một loại virus gây bệnh đặc hiệu trên sâu tơ (Plutella xylostella), được ứng dụng phổ biến trong các chế phẩm thuốc bảo vệ thực vật sinh học. Nhằm kiểm soát chất lượng và hiệu lực của các sản phẩm chứa PlxyGV, nghiên cứu này đã xây dựng phương pháp định lượng virus bằng kỹ thuật real-time PCR. Một đoạn 222 bp thuộc gen ORF30 của PlxyGV, mã hóa protein vỏ ODV-E66, được nhân dòng vào vector pGEM-T Easy, biến nạp vào E. coli DH5α và xác nhận bằng giải trình tự Sanger, cho kết quả tương đồng ≥ 99 % so với trình tự tham chiếu ORF30 đã công bố (GenBank: MN099286.1). Phương pháp real-time PCR cho độ nhạy cao với giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng đều đạt 10¹ copies/µL, độ chính xác và độ đặc hiệu vượt 95%. Đường chuẩn được thiết lập dựa trên mối tương quan tuyến tính giữa chu kỳ ngưỡng và log nồng độ DNA virus (R² = 0,9957), với hiệu suất khuếch đại đạt 90,1%. Các thông số độ lặp lại (RSDr = 0,20%) và độ tái lập (RSDR = 0,28%) đều nằm trong giới hạn cho phép theo tiêu chuẩn quốc tế ISO 22118:2011.

Từ khóa:

realtime PCR, Plutella xylostella granulovirus, nhân dòng.

Trích dẫn

[1]. M. Tudi et al., “Agriculture development, pesticide application and its impact on the environment,” International Journal of Environmental Research and Public Health, vol. 18, no. 3, p. 1112, 2021.
[2]. V. M. Pathak et al., “Current status of pesticide effects on environment, human health and it’s eco-friendly management as bioremediation: A comprehensive review,” Frontiers in Microbiology, vol. 13, p. 962619, 2022.
[3]. C. Shekhar et al., “A systematic review of pesticide exposure, associated risks, and long-term human health impacts,” Toxicology Reports, vol. 13, pp. 101840–101855, 2024.
[4]. R. Jayaraj, P. Megha, and P. Sreedev, “Organochlorine pesticides, their toxic effects on living organisms and their fate in the environment,” Interdisciplinary Toxicology, vol. 9, no. 3–4, pp. 90–100, 2016.
[5]. M. S. Ayilara et al., “Biopesticides as a promising alternative to synthetic pesticides: A case for microbial pesticides, phytopesticides, and nanobiopesticides,” Frontiers in Microbiology, vol. 14, p. 1040901, 2023.
[6]. G. M. Daraban, R.-M. Hlihor, and D. Suteu, “Pesticides vs. Biopesticides: From pest management to toxicity and impacts on the environment and human health,” Toxics, vol. 11, no. 12, p. 983, Dec. 2023
[7]. P. Cai and G. Dimopoulos, “Microbial biopesticides: A one health perspective on benefits and risks,” One Health, vol. 20, p. 100962, 2025.
[8]. A. K. Priya, A. Alagumalai, D. Balaji, and H. Song, “Bio-based agricultural products: a sustainable alternative to agrochemicals for promoting a circular economy,” RSC Sustainability, vol. 1, no. 4, pp. 746–762, 2023.
[9]. M. Martínez-Balerdi, J. Caballero, E. Aguirre, P. Caballero, and I. Beperet, “Baculoviruses as microbial pesticides: Potential, challenges, and market overview,” Viruses, vol. 17, no. 7, p. 917, 2025.
[10]. H.-R. Lee, J. Jung, M. Riu, and C.-M. Ryu, “A new frontier for biological control against plant pathogenic nematodes and insect pests I: By microbes,” Research in Plant Disease, vol. 23, no. 2, pp. 114–149, 2017.
[11]. Y. Gelaye and B. Negash, “The role of baculoviruses in controlling insect pests: A review,” Cogent Food & Agriculture, vol. 9, no. 1, p. 2254139, 2023.
[12]. S. Bhattacharyya and D. K. Bhattacharya, “Pest control through viral disease: Mathematical modeling and analysis,” Journal of Theoretical Biology, vol. 238, no. 1, pp. 177–197, 2006.
[13]. P. Bhadoria, M. Nagar, V. Bharihoke, and A. S. Bhadoria, “Ethephon, an organophosphorous, a fruit and vegetable ripener: Has potential hepatotoxic effects?,” Journal of Family Medicine and Primary Care, vol. 7, no. 1, pp. 179–183, 2018.
[14]. C. A. Damalas and S. D. Koutroubas, “Farmers’ exposure to pesticides: Toxicity types and ways of prevention,” Toxics, vol. 4, no. 1, p. 1, 2016.
[15]. J. H. Chang et al., “An improved baculovirus insecticide producing occlusion bodies that contain Bacillus thuringiensis insect toxin,” Journal of Invertebrate Pathology, vol. 84, no. 1, pp. 30–37, 2003.
[16]. R. Chaudhary et al., “Microbial bio-control agents: A comprehensive analysis on sustainable pest management in agriculture,” Journal of Agriculture and Food Research, vol. 18, p. 101421, 2024.
[17]. H. Zhang et al., “Establishment of a rapid detection method for Plutella xylostella granulovirus based on qPCR,” Heliyon, vol. 9, no. 4, p. e15170, 2023.
[18]. R. I. Graham et al., “Development of a real-time qPCR assay for quantification of covert baculovirus infections in a major African crop pest,” Insects, vol. 6, no. 3, pp. 746–759, 2015.
[19]. L. A. da Silva et al., “Identification and detection of known and new viruses in larvae of laboratory-reared fall armyworm, Spodoptera frugiperda,” Journal of Invertebrate Pathology, vol. 210, p. 108290, 2025.
[20]. “Vietnam to increase the use of biological plant protection products by an additional 30%,” Tuoi Tre Online, Dec. 28, 2023. [Online]. Available: https://tuoitre.vn/viet-nam-se-su-dung-thuoc-bao-ve-thuc-vat-sinh-hoc-tang-them-30-20231228155953896.htm
[21]. N. T. Hanh, L. V. Hoa, T. H. Ba, P. V. Quan, L. T. Long, and P. T. Loan, “Producing positive control materials for template in PCR testing to detect botulinum neurotoxin types A and B genes,” Vietnam Journal of Food Control, vol. 7, no. 1, pp. 53–67, 2024.

 Gửi bài